由於多種疾病或因素均可引起葡萄糖耐量降低或空腹血糖增高，因此必須與原發性糖尿病相鑒別。
腎性糖尿：大多因為腎小管重吸收功能低下，如腎病綜合征、慢性腎炎，或由於先天性腎小管細胞功能缺陷，使腎小管對葡萄糖的重吸收發生障礙，腎排糖阈下降，病人血糖雖正常，但尿糖卻為陽性。不過其葡萄糖耐量均正常，血胰島素也正常。一般無“三多一少”症狀。腎性糖尿多發生在青、中年，男性多於女性。少數婦女在妊娠期可因腎小球濾過率增加，暫時性腎糖閉低下也可出現糖尿，但須與原發性糖尿病加以鑒別。
飯後糖尿：因糖類在胃腸道吸收過速，如胃空腸吻合術後、甲狀腺功能亢進、植物神經功能紊亂和嚴重肝病等，進食後可出現暫時性高血糖和尿糖。但口服葡萄糖耐量試驗、空腹血糖正常，半小時和l小時血糖超過正常，2小時和3小時血糖正常或低於正常。除肝病外，靜脈注射葡萄糖田量試驗正常。
應激性糖尿：在腦血管意外、顱腦外傷、急性心肌梗塞等疾患時，可出現暫時性高血糖和尿糖。
繼發性糖尿病：胰源性糖尿病，如胰腺炎、胰腺切除、胰腺癌；內分泌性糖尿病，如甲狀腺功能亢進，嗜鉻細胞瘤、柯興氏綜合征等，可從病史和臨床表現予以鑒別。
慢性疾病長期體力活動減少或臥床休息者，會使葡萄糖耐量減低，但空腹血糖一般正常。饑餓及營養不良：者，體內組織利用葡萄糖的能力減弱、胰島素分泌減少，故也可有葡萄糖耐量降低，偶有糖尿出現。
藥物：某些藥物可影響葡萄糖耐量，故應在試驗前停藥3～7天。甚至一個月以上。升高血糖的藥物有：促腎上腺皮質激素如可的松、生長激素、兒茶酚膠、咖啡因、速尿、胰升血糖素、消炎痛、異煙肼、尼古丁、女性口服避孕藥、酚妥拉明、噻嗪類利尿藥和苯妥因鈉等。降低血糖藥物有：他巴唑、心得安、乙醇、水楊酸鹽、磺腮類藥等。