專家稱糖尿病足可治愈

　　２００９年２月１９日，由蘇格蘭國際發展局和復旦大學主辦、上海新生源醫藥研究有限公司和山東綠葉制藥有限公司協辦的中國－蘇格蘭糖尿病研究合作論壇在上海召開。來自中國和蘇格蘭的糖尿病專家在本次論壇上共同探討了胚胎干細胞在糖尿病治療中的應用、基因組科學的支持應用等目前國際糖尿病研究領域最前沿的的課題。

世界衛生組織統計顯示，目前全球有超過２．４億糖尿病病人。預計到２０２５年，糖尿病全球患病人數將超過３．８億。作為一種非傳染性疾病，糖尿病對人類健康和社會經濟的威脅已經與第一大傳染病艾滋病相當。由國際糖尿病聯盟（ＩＤＦ）公布的另一項數據指出，中國目前有５０００萬人罹患糖尿病，並且以每年１０％的速度增長。按此速度，預計在２０２５年至２０５０年期間，中國的糖尿病發病率將超過１０％，達到與發達國家相同的水平。

蛋白質轉導結構域（ＰＴＤ）是一類具有跨膜活性的、富含鹼性氨基酸殘基的肽段。ＰＴＤｓ作為載體能夠攜帶外源大分子進入細胞和活體動物組織。因此，無論在基礎分子生物學研究領域，還是在發展新型、高效、特異性強的治療性藥物及疫苗研究領域，ＰＴＤｓ都具有引人注目的應用前景。

復旦大學生命科學院副院長盧大儒博士開展的相關基礎研究，引起了與會者的關注。他報告說，在對胰腺發育分化及成熟胰島細胞增殖過程中起重要作用的轉錄因子Ｐｄｘ１、Ｎｇｎ３、ＮｅｕｒｏＤ、Ｐａｘ４和ＭａｆＡ進行研究時他發現，這些轉錄因子能夠進入多種細胞系中。進而他對這些蛋白質轉導結構域進行了分析，並根據已知蛋白質轉導結構信息，構建、表達、純化了一系列轉錄因子突變體與ＥＧＦＰ的融合蛋白質。進胞實驗結果揭示了具體的蛋白質轉導結構域（ＰＴＤ），而含有ＰＴＤ－ＥＧＦＰ的融合蛋白質可以高效進入包括大鼠胰島細胞在內的多種細胞。在進胞機制的研究中他發現，這些ＰＴＤ首先黏附於細胞膜表面，而後主要通過巨胞飲作用進入細胞。ＥＭＳＡ及熒光素酶報告基因實驗結果顯示，跨膜後的胰腺轉錄因子仍然可以行使轉錄因子功能，即與其特異性結合序列結合，競爭性地抑制或激活相關基因的作用，如Ｐａｘ４能夠抑制Ｐａｘ６的轉錄激活作用，將外源純化的Ｐａｘ４蛋白質加入Ｍｉｎ６細胞，它能夠保護細胞免於ＴＮＦ－α引發的凋亡。轉導進入大鼠胰島細胞的Ｐａｘ４蛋白質通過促進ｂｃｌ－ｘＬ和ｃ－ｍｙｃ基因表達，增加細胞存活率，延長胰島細胞的體外培養時間。ＭａｆＡ蛋白質轉導入大鼠小腸上皮細胞系ＩＥＣ６細胞，能夠促進其Ｉｎｓｕｌｉｎ　２基因轉錄。利用細胞免疫熒光技術他們還檢測到ＭａｆＡ實驗組細胞表達胰島素。糖尿病小鼠血糖在尾靜脈注射ＭａｆＡ蛋白質２４小時時降至正常水平。ＲＴ－ＰＣＲ、Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ熒光定量ＰＣＲ實驗結果表明，ＭａｆＡ能夠誘導小腸組織胰島素基因轉錄增加。組織免疫熒光結果顯示注射ＭａｆＡ蛋白質後小腸絨毛間的上皮細胞中存在有胰島素陽性細胞。