人體適合注射胰島素的部位是腹部、手臂前外側、大腿前外側和臀部外上1/4。主要是因為這些部位下面都有一層可吸收胰島素的皮下脂肪組織，而且沒有較多的神經分布，注射時不舒適的感覺相對較少。注意不要打到肌肉組織。
腹部是胰島素注射優先選擇的部位，腹部的胰島素吸收率達到100%，吸收速度較快且皮下組織較肥厚，能減少注射至肌肉層的風險，最容易進行自我注射。注射部位在臍周3厘米以外。
手臂的皮下層較薄，注射時必須捏起皮膚注射，因此不方便自我注射，可由他人協助注射。手臂皮下組織的胰島素吸收率為85%，吸收速度較快。
大腿較適合進行自我注射，皮下層很薄，要捏起皮膚注射，皮下組織的胰島素吸收率為70%，吸收速度慢。注意大腿內側有較多的血管和神經分布，不適宜注射。
臀部皮下層最厚，注射時可不捏起皮膚。由於臀部的胰島素吸收率低、吸收速度慢，較少使用，可注射中長效胰島素。
另外，注射部位參與運動時會加快胰島素的作用，打球或跑步前不應在手臂和大腿注射，以免過快吸收引起低血糖。腹部注射一般不受四肢運動影響。還要注意不同注射部位間的輪換，兩次注射部位要距離2厘米，並盡量避免一個月內重復使用同一注射點。